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      行业资讯丨TrypLE和Trypsin的对比以及TrypLE的检测

      TrypLETrypsin的对比以及TrypLE的检测

      胰酶消化的细节,你知道多少?

      细胞学实验中我们除了遇到污染的难题之外,消化的问题,也不容小觑。消化不好,就会导致细胞状态变差,甚至死亡。尤其是在某些需要无血清培养的贴壁细胞中,可以尝试用 TrypLE消化细胞,因为TrypLE不需要胰酶抑制剂终止消化,直接用PBS稀释终止消化就可以了。这样避免了与血清的直接接触,血清中的复杂成分也不会干扰细胞潜在的生理功能,改变细胞分裂的正常状态,对于一些敏感细胞来说,这个改变是致命的。

      有科学家称,在培养某种上皮细胞时,一开始用trypsin消化血清终止之后,细胞还是正常生长的,但是发现细胞消化重悬之后细胞贴壁,但是不变形,总是以为消化时间过长导致的;后来降低了消化时间,情况未改观,并且一次比一次明显;到最后,细胞附着在培养瓶底部、球形、一直不变形;而变了形的细胞,状态和之前的完全不一样,好像变成了另外一种细胞,最后很快就死亡了。后来更换使用了TrypLE,情况发生好转,因为不需要用血清终止消化,只需要用PBS终止消化就可以了,细胞生长状态明显变好。

      让我们看一下TrypLETrypsin具体各有什么优缺点吧。

      Trypsin的缺点:

      细胞损伤大--Trypsin抑制剂需要将酶快速灭活,这会导致细胞损失或死亡。

      需冷冻保存--Trypsin必须保存在-20 ℃,在经过多次反复冻融或在4 ℃长期保存后,稳定性丧失。

      批间差异大--Trypsin为动物源性,批次之间差异性大。

      TrypLE的优势

      细胞损伤?。?/span>TrypLE为非动物源性的消化酶,更纯,对细胞损伤更小,提高种板效率。因为TrypLE作用细胞温和,不需要 Trypsin酶抑制剂。

      稳定性很高--TrypLE可以稳定的保存于室温,节省了冷冻空间,同时提供即时可用的便利。

      应用范围广--TrypLE是在有血清或无血清环境中培养的多种不同细胞系的理想选择,可以直接替代您现有步骤中所用的0.25% trypsin EDTA试剂。

      TrypLE的超高稳定性

      TrypLE表现的动力学及剪切特异性与 Trypsin 非常近似,而其稳定性却比前者有明显提高。工作储存温度可以为室温保存6个月或37℃一周后酶活性仍不丢失。TrypLE试剂的纯度比Trypsin高,室温稳定性比较高。

      所以,TrypLE就相当于某些无血清生长的贴壁细胞的救星啦!

      TrypLE检测

      在单抗药物、疫苗类药物以及细胞治疗药物等生产中, TrypLE已经广泛的被使用来对贴壁细胞进行消化。生物制品生产相关法规中明确了细胞培养时添加物(如TrypLE、核酸酶、BSA等)检测的必要性,故TrypLE的残留量检测也愈发引起重视。

      君研生物自主研发的重组胰蛋白酶类似物定量检测试剂盒可以有效,快速,便捷地检测各种样品中TrypLE的残留量。

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